Los exosomas son un subtipo espec\u00edfico de ves\u00edcula extracelular: part\u00edculas de escala nanom\u00e9trica rodeadas por una bicapa lip\u00eddica que las c\u00e9lulas liberan en su entorno, diferenciadas de otras ves\u00edculas extracelulares por el lugar dentro de la c\u00e9lula donde se forman. Ese detalle contiene toda la definici\u00f3n. [1][5][6]<\/p>\n
Pregunte a diez proveedores qu\u00e9 es un exosoma y la mayor\u00eda describir\u00e1 algo parecido a una part\u00edcula muy peque\u00f1a que transporta mol\u00e9culas de se\u00f1alizaci\u00f3n. Es cierto, pero tambi\u00e9n lo es para varios otros tipos de ves\u00edculas extracelulares que no son exosomas. El est\u00e1ndar actual de nomenclatura de la International Society for Extracellular Vesicles, MISEV2023, es expl\u00edcito en este punto: “exosoma” es una afirmaci\u00f3n sobre la biog\u00e9nesis, espec\u00edficamente que una ves\u00edcula se form\u00f3 dentro de un compartimento endosomal y fue liberada cuando ese compartimento se fusion\u00f3 con la membrana externa de la c\u00e9lula. A menos que ese origen se haya demostrado realmente para el material en cuesti\u00f3n, el t\u00e9rmino correcto es “ves\u00edcula extracelular peque\u00f1a”, no “exosoma”. [1][2]<\/p>\n
Esa distinci\u00f3n es un indicador razonable de cu\u00e1nto comprende realmente un proveedor lo que est\u00e1 vendiendo. Esta gu\u00eda explica qu\u00e9 son los exosomas, c\u00f3mo se forman, qu\u00e9 transportan, c\u00f3mo un laboratorio confirma qu\u00e9 hay realmente en un vial y por qu\u00e9 el origen del material cambia la respuesta.<\/p>\n
Las ves\u00edculas extracelulares, o EV, son la categor\u00eda general: part\u00edculas liberadas por c\u00e9lulas, rodeadas por una bicapa lip\u00eddica e incapaces de replicarse por s\u00ed mismas. Dentro de esta categor\u00eda existe una variedad de subtipos que difieren seg\u00fan d\u00f3nde y c\u00f3mo se forman dentro de la c\u00e9lula. Hist\u00f3ricamente, el campo las dividi\u00f3 aproximadamente en dos grupos basados en la biog\u00e9nesis: ves\u00edculas que brotan directamente de la membrana plasm\u00e1tica, denominadas ectosomas o microves\u00edculas, y ves\u00edculas que se forman dentro de compartimentos endos\u00f3micos tard\u00edos denominados cuerpos multivesiculares, que posteriormente se liberan cuando esos compartimentos se fusionan con la membrana plasm\u00e1tica. El segundo grupo es lo que originalmente significaba “exosoma”. [1][6][10]<\/p>\n
El problema que MISEV2023 aborda directamente es que ning\u00fan m\u00e9todo de aislamiento disponible actualmente puede seleccionar espec\u00edficamente el origen endosomal. La ultracentrifugaci\u00f3n, la cromatograf\u00eda de exclusi\u00f3n por tama\u00f1o, la precipitaci\u00f3n y cualquier otra t\u00e9cnica de separaci\u00f3n habitual extraen simult\u00e1neamente una poblaci\u00f3n mixta de ves\u00edculas de m\u00faltiples or\u00edgenes, porque no existe un marcador exclusivo de la v\u00eda endosomal. Por lo tanto, cuando un laboratorio o proveedor a\u00edsla ves\u00edculas de medios condicionados o de una fuente celular y denomina al producto “exosomas”, normalmente est\u00e1 haciendo una afirmaci\u00f3n sobre el origen que el propio m\u00e9todo de aislamiento no puede respaldar realmente (Welsh et al., <\/a>Journal of Extracellular Vesicles<\/em><\/a>, 2024<\/a>).<\/p>\n MISEV2023 responde a esto utilizando un lenguaje operativo cuando no se dispone de un origen demostrado: “EV peque\u00f1a” para ves\u00edculas aisladas generalmente inferiores a 200 nan\u00f3metros de di\u00e1metro y “EV grande” para aquellas superiores a ese umbral. Los t\u00e9rminos de biog\u00e9nesis como “exosoma” y “ectosoma” se reservan para los casos en los que el origen subcelular se haya demostrado realmente [1][2] para esa fuente y condici\u00f3n espec\u00edficas. En la mayor\u00eda de las preparaciones comercializadas, esa es la excepci\u00f3n y no la regla.<\/p>\n Este es el filtro individual m\u00e1s \u00fatil que tiene un profesional cl\u00ednico para evaluar la documentaci\u00f3n t\u00e9cnica de un proveedor. Una empresa que utiliza de forma coherente y correcta “ves\u00edcula extracelular peque\u00f1a”, excepto cuando dispone de evidencia sobre el origen endosomal, est\u00e1 describiendo su producto con precisi\u00f3n. Una empresa cuyas p\u00e1ginas utilizan “exosoma” constantemente sin abordar nunca esta distinci\u00f3n, en el mejor de los casos utiliza de forma imprecisa una abreviatura de la industria y, en el peor, est\u00e1 haciendo una afirmaci\u00f3n sobre el origen que no ha verificado.<\/p>\n Una referencia r\u00e1pida, ya que estos t\u00e9rminos se utilizan de forma inconsistente tanto en la literatura como en el marketing de los proveedores.<\/p>\n Ves\u00edcula extracelular (EV):<\/strong> T\u00e9rmino general para cualquier part\u00edcula liberada por una c\u00e9lula que est\u00e1 rodeada por una bicapa lip\u00eddica y no puede replicarse por s\u00ed misma. Incluye exosomas, ectosomas, cuerpos apopt\u00f3ticos y otras ves\u00edculas rodeadas por membrana de origen celular. [1][4][10]<\/p>\n Exosoma:<\/strong> Subtipo de EV peque\u00f1a espec\u00edfico de la biog\u00e9nesis que se forma como una ves\u00edcula intraluminal dentro de un cuerpo multivesicular y se libera cuando ese compartimento se fusiona con la membrana plasm\u00e1tica. El t\u00e9rmino es preciso \u00fanicamente cuando se ha demostrado el origen endosomal para la preparaci\u00f3n espec\u00edfica.<\/p>\n Ves\u00edcula extracelular peque\u00f1a (sEV):<\/strong> T\u00e9rmino operativo recomendado por MISEV2023 para ves\u00edculas aisladas generalmente inferiores a 200 nan\u00f3metros de di\u00e1metro, utilizado cuando la biog\u00e9nesis no ha sido confirmada. Este es el t\u00e9rmino predeterminado preciso para la mayor\u00eda de las preparaciones aisladas comercialmente.<\/p>\n Ectosoma (microves\u00edcula):<\/strong> Ves\u00edcula que brota directamente hacia el exterior desde la membrana plasm\u00e1tica en lugar de formarse primero dentro de un compartimento interno. Los ectosomas se superponen en tama\u00f1o con las EV peque\u00f1as, lo que explica en parte por qu\u00e9 el tama\u00f1o por s\u00ed solo no puede distinguir ambos tipos.<\/p>\n Cuerpo apopt\u00f3tico:<\/strong> Ves\u00edcula de mayor tama\u00f1o liberada durante la muerte celular programada, generalmente muy por encima del rango de tama\u00f1o de las EV peque\u00f1as y estructural y funcionalmente distinta de los exosomas y ectosomas.[1][10]<\/p>\n Los tama\u00f1os citados habitualmente para los exosomas espec\u00edficamente, aproximadamente de 30 a 150 nan\u00f3metros, proceden de literatura anterior al marco operativo actual del campo. Ese rango nunca estuvo vinculado a un marcador validado espec\u00edfico del origen. El umbral de MISEV2023 para la categor\u00eda m\u00e1s amplia de EV peque\u00f1as se sit\u00faa por debajo de 200 nan\u00f3metros, y esta cifra cuenta con el consenso actual.<\/p>\n La v\u00eda de biog\u00e9nesis que define un verdadero exosoma comienza dentro de la c\u00e9lula, no en la membrana. Comienza cuando un segmento de la membrana endosomal brota hacia el interior, hacia la luz del propio endosoma, en lugar de hacerlo hacia el espacio extracelular. La formaci\u00f3n repetida de brotes hacia el interior produce un compartimento denominado cuerpo multivesicular, lleno de estas ves\u00edculas intraluminales. A partir de ah\u00ed, ocurren una de dos cosas: el cuerpo multivesicular puede fusionarse con un lisosoma, en cuyo caso su contenido se degrada, o puede desplazarse y fusionarse con la membrana plasm\u00e1tica, liberando sus ves\u00edculas intraluminales al entorno extracelular. Esas ves\u00edculas liberadas son exosomas.[1][6][8][10]<\/p>\n Un ectosoma se forma de manera diferente. Brota directamente hacia el exterior desde la membrana plasm\u00e1tica en un solo paso, sin pasar nunca por un compartimento endosomal interno. Ambas v\u00edas implican diferentes mecanismos de transporte de membrana y una clasificaci\u00f3n diferente del contenido en la ves\u00edcula en formaci\u00f3n. Esta es una de las razones por las que los exosomas y los ectosomas pueden transportar contenidos moleculares significativamente diferentes incluso cuando terminan teniendo un tama\u00f1o similar (Zhang et al., <\/a>Cell & Bioscience<\/em><\/a>, 2019<\/a>). [6][8]<\/p>\n Nada de esto ocurre de forma aislada respecto a la fisiolog\u00eda general de la c\u00e9lula. Qu\u00e9 contenido se clasifica en las ves\u00edculas intraluminales en formaci\u00f3n, con qu\u00e9 intensidad las produce un tipo celular determinado y bajo qu\u00e9 condiciones aumenta su liberaci\u00f3n son \u00e1reas activas de investigaci\u00f3n en curso, no cuestiones definitivamente establecidas. Lo que s\u00ed est\u00e1 bien establecido es el mecanismo estructural: origen endosomal, formaci\u00f3n de ves\u00edculas intraluminales, transporte del cuerpo multivesicular y fusi\u00f3n con la membrana plasm\u00e1tica como paso de liberaci\u00f3n.<\/p>\n Los exosomas y otras EV peque\u00f1as transportan una mezcla de prote\u00ednas, l\u00edpidos y \u00e1cidos nucleicos, incluidos microARN y fragmentos de ARN mensajero, encerrados y protegidos por la bicapa lip\u00eddica que forma el l\u00edmite exterior de la ves\u00edcula. Este encapsulamiento es funcionalmente importante. Es lo que permite que este contenido viaje a trav\u00e9s del l\u00edquido extracelular sin degradarse como ocurrir\u00eda casi inmediatamente con el ARN o las prote\u00ednas libres.<\/p>\n El mecanismo de acci\u00f3n generalmente aceptado es la se\u00f1alizaci\u00f3n paracrina: una ves\u00edcula liberada es captada por una c\u00e9lula diana cercana o distante, o se fusiona con ella, entregando su contenido y potencialmente influyendo en la expresi\u00f3n g\u00e9nica o el estado de se\u00f1alizaci\u00f3n de esa c\u00e9lula. Los enfoques basados en c\u00e9lulas, como la administraci\u00f3n de c\u00e9lulas madre mesenquimales, funcionan de manera diferente. Se introduce una c\u00e9lula viva y su funci\u00f3n depende en parte de su propia actividad y migraci\u00f3n continuas. Una EV peque\u00f1a transporta un contenido molecular y nada m\u00e1s. No est\u00e1 viva y no puede dividirse ni implantarse.<\/p>\n La composici\u00f3n de la superficie es tan importante como el contenido interno. Las EV peque\u00f1as suelen presentar un conjunto de prote\u00ednas de membrana, incluidas tetraspaninas como CD9, CD63 y CD81, que se utilizan habitualmente en el campo como marcadores positivos de identidad, aunque ninguna de ellas es exclusivamente espec\u00edfica de las ves\u00edculas de origen endosomal por s\u00ed sola. Esta limitaci\u00f3n es precisamente la raz\u00f3n por la que MISEV2023 exige un enfoque de caracterizaci\u00f3n basado en m\u00faltiples marcadores y m\u00faltiples m\u00e9todos, en lugar de depender de un \u00fanico marcador.<\/p>\n Dado que ning\u00fan marcador individual es espec\u00edfico de los exosomas, MISEV2023 recomienda caracterizar una preparaci\u00f3n en varias categor\u00edas independientes: [1][2]<\/p>\n Cada categor\u00eda comprueba algo que las dem\u00e1s no pueden comprobar, por lo que los laboratorios las utilizan conjuntamente en lugar de basarse en un \u00fanico resultado. [1][4]<\/p>\n [VERIFICAR: el panel exacto de marcadores que ejecuta el laboratorio de CellGenic por lote, incluidos los marcadores positivos y negativos que se analizan y mediante qu\u00e9 m\u00e9todo. Marcador de posici\u00f3n hasta su confirmaci\u00f3n; no publicar con una lista de marcadores inventada.]<\/strong><\/p>\n Aqu\u00ed es donde la documentaci\u00f3n de un proveedor demuestra si resiste el escrutinio o no. Un Certificado de An\u00e1lisis que enumera un panel de marcadores espec\u00edfico y claramente identificado asociado a un n\u00famero de lote concreto, junto con datos sobre el tama\u00f1o de las part\u00edculas y un m\u00e9todo de aislamiento declarado, describe una preparaci\u00f3n realmente caracterizada. Un COA que afirma pureza o identidad sin especificar qu\u00e9 se analiz\u00f3 est\u00e1 afirmando una conclusi\u00f3n sin mostrar el trabajo que la sustenta. C\u00f3mo se realiza ese aislamiento en primer lugar y qu\u00e9 selecciona y qu\u00e9 no selecciona es una cuesti\u00f3n independiente, abordada en nuestra gu\u00eda sobre c\u00f3mo se a\u00edslan y obtienen los exosomas<\/a>.<\/p>\n El origen celular o tisular determina la composici\u00f3n de los exosomas tanto como la v\u00eda de biog\u00e9nesis. Las ves\u00edculas aisladas de c\u00e9lulas madre mesenquimales, c\u00e9lulas madre pluripotentes inducidas y tejido vegetal no son materiales de partida intercambiables, aunque cada uno se comercialice bajo la misma etiqueta general de “exosoma”. Difieren en los tipos celulares que las producen, el contenido que esos tipos celulares tienden a empaquetar y, en algunos casos, en el grado de caracterizaci\u00f3n de la propia v\u00eda de biog\u00e9nesis para esa fuente. El material derivado de MSC tambi\u00e9n var\u00eda seg\u00fan el tejido de origen. Las fuentes de m\u00e9dula \u00f3sea, tejido adiposo y cord\u00f3n umbilical producen MSC con perfiles de secreci\u00f3n mediblemente diferentes. Este es un detalle del origen que los proveedores rara vez especifican por iniciativa propia.<\/p>\n Nuestra [comparaci\u00f3n del origen de exosomas derivados de MSC, iPSC y plantas](URL-TBD: msc-ipsc-plant-exosome-sourcing) explica c\u00f3mo difieren estos materiales de partida en la pr\u00e1ctica. Para la l\u00ednea de terapia celular de CellGenic, que comparte algunas consideraciones de origen pero constituye una categor\u00eda de producto estructuralmente distinta de los exosomas, consulte la [p\u00e1gina principal sobre c\u00e9lulas Muse](URL-TBD: muse-cell-pillar-page).<\/p>\n Utilizar correctamente la nomenclatura de los exosomas funciona como un indicador de algo m\u00e1s amplio: si las dem\u00e1s afirmaciones t\u00e9cnicas de un proveedor, sobre esterilidad, potencia y consistencia entre lotes, se gestionan con la misma precisi\u00f3n o con la misma falta de precisi\u00f3n. Una empresa que puede decirte exactamente qu\u00e9 afirmaci\u00f3n sobre la biog\u00e9nesis est\u00e1 haciendo y cu\u00e1l no est\u00e1 haciendo sobre su propio material es una empresa cuyo Certificado de An\u00e1lisis probablemente merezca confianza tambi\u00e9n en los dem\u00e1s aspectos.<\/p>\n Si est\u00e1s comparando material derivado de exosomas con un enfoque basado en c\u00e9lulas para un protocolo determinado, nuestra comparaci\u00f3n de exosomas y c\u00e9lulas madre mesenquimales<\/a> explica en qu\u00e9 se diferencian realmente ambos, m\u00e1s all\u00e1 de la terminolog\u00eda. Antes de introducir cualquier preparaci\u00f3n de ves\u00edculas extracelulares en un protocolo de investigaci\u00f3n, vale la pena leer nuestra [descripci\u00f3n general de las consideraciones de seguridad de los exosomas](URL-TBD: exosome-safety-considerations) junto con esta gu\u00eda.<\/p>\n Los proveedores que eval\u00faen CellGenic como fuente de productos de ves\u00edculas extracelulares para uso en investigaci\u00f3n pueden solicitar acceso de proveedor<\/a> para revisar directamente la documentaci\u00f3n espec\u00edfica de cada lote.<\/p>\n \u00bf”Exosoma” es simplemente un t\u00e9rmino de marketing o significa algo espec\u00edfico?<\/strong> \u00bfPor qu\u00e9 importa el origen endosomal si las ves\u00edculas tienen un aspecto y un comportamiento similares de todos modos?<\/strong> \u00bfPuede un proveedor llamar leg\u00edtimamente “exosomas” a su producto sin confirmar el origen endosomal?<\/strong> \u00bfQu\u00e9 marcadores deber\u00eda esperar que analice un proveedor y por qu\u00e9 no es suficiente un solo marcador?<\/strong> \u00bfC\u00f3mo afecta el origen de los exosomas (MSC, iPSC, derivados de plantas) a lo que hay en el vial?<\/strong> \u00bfUn producto correctamente etiquetado como “ves\u00edcula extracelular peque\u00f1a” significa que tiene una calidad inferior a uno etiquetado como “exosoma”?<\/strong> Los exosomas son un subtipo espec\u00edfico de ves\u00edcula extracelular: part\u00edculas de escala nanom\u00e9trica rodeadas por una bicapa lip\u00eddica que las c\u00e9lulas liberan en su entorno, diferenciadas de otras ves\u00edculas extracelulares por el lugar dentro de la c\u00e9lula donde se forman. Ese detalle contiene toda la definici\u00f3n. [1][5][6] Pregunte a diez proveedores qu\u00e9 es un exosoma […]<\/p>\n","protected":false},"author":174,"featured_media":22954,"comment_status":"open","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"footnotes":""},"categories":[78],"tags":[],"class_list":["post-23509","post","type-post","status-publish","format-standard","has-post-thumbnail","hentry","category-sin-categorizar"],"acf":[],"yoast_head":"\nSubtipos de ves\u00edculas extracelulares de un vistazo<\/h2>\n
C\u00f3mo se forman los exosomas: la v\u00eda endosomal<\/h2>\n
Qu\u00e9 contienen: contenido y funci\u00f3n<\/h2>\n
C\u00f3mo confirma realmente un laboratorio qu\u00e9 hay en un vial<\/h2>\n
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El origen determina lo que realmente est\u00e1s comprando<\/h2>\n
Por qu\u00e9 esta distinci\u00f3n importa para un protocolo de investigaci\u00f3n<\/h2>\n
Preguntas frecuentes<\/h2>\n
\nSeg\u00fan MISEV2023, “exosoma” se refiere a una ves\u00edcula cuyo origen endosomal ha sido demostrado, una afirmaci\u00f3n mecan\u00edstica que la mayor\u00eda de los textos de marketing omiten discretamente. Si ese origen no se ha demostrado para una preparaci\u00f3n determinada, el t\u00e9rmino correcto es “ves\u00edcula extracelular peque\u00f1a”.<\/p>\n
\nEl origen afecta la clasificaci\u00f3n del contenido, la composici\u00f3n de la superficie y la maquinaria de biog\u00e9nesis implicada, todo lo cual puede afectar significativamente a lo que contiene realmente una preparaci\u00f3n, incluso entre ves\u00edculas de tama\u00f1o similar. Tratar “exosoma” como una categor\u00eda de tama\u00f1o en lugar de una categor\u00eda de origen oculta una distinci\u00f3n biol\u00f3gica real.<\/p>\n
\nSolo si ese origen se ha demostrado realmente para la fuente y condici\u00f3n espec\u00edficas, algo que la mayor\u00eda de los m\u00e9todos de aislamiento comercial no pueden establecer por s\u00ed solos. [1][7] En la pr\u00e1ctica, la mayor\u00eda de las preparaciones comercializadas se describen con mayor precisi\u00f3n como ves\u00edculas extracelulares peque\u00f1as que como exosomas en el sentido estricto de MISEV2023.<\/p>\n
\nNing\u00fan marcador individual es exclusivo de las ves\u00edculas de origen endosomal. Por eso MISEV2023 recomienda un enfoque basado en m\u00faltiples marcadores y m\u00faltiples m\u00e9todos: marcadores positivos de tetraspaninas, marcadores negativos de contaminaci\u00f3n, datos sobre el tama\u00f1o de las part\u00edculas y confirmaci\u00f3n morfol\u00f3gica, comprobados conjuntamente en lugar de forma aislada.<\/p>\n
\nEl tipo de c\u00e9lula o tejido productor determina la composici\u00f3n del contenido y, en algunos casos, el grado de caracterizaci\u00f3n de la propia v\u00eda de biog\u00e9nesis. El material procedente de diferentes fuentes no es intercambiable, aunque est\u00e9 etiquetado con el mismo t\u00e9rmino general.<\/p>\n
\nNo. Un producto correctamente etiquetado como ves\u00edcula extracelular peque\u00f1a simplemente describe con precisi\u00f3n su origen demostrado, en lugar de realizar una afirmaci\u00f3n de biog\u00e9nesis no verificada. La precisi\u00f3n en el etiquetado indica que un proveedor comprende lo que realmente est\u00e1 vendiendo.<\/p>\nReferencias<\/h2>\n
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