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Tinción de azul tripán (0,4%) para utilizar con el Contador celular automatizado

La tinción con azul tripán es un método antiguo y ampliamente utilizado para identificar las células muertas. Sólo las células con membranas intactas pueden excluir eficazmente el colorante, por lo que las células muertas con membranas comprometidas se tiñen. La tinción con azul tripán es el método empleado por la familia Countess de contadores celulares automatizados, y esta solución de azul tripán al 0,4% es la concentración correcta para su uso en estos instrumentos.

Nota: Los precipitados son bastante frecuentes en el azul tripán, y suelen aumentar con el tiempo de almacenamiento y la congelación. Los tres enfoques siguientes pueden ayudar a minimizar el precipitado de azul tripán en tus muestras de recuento celular:

1. Filtración estéril del azul tripán utilizando un filtro de 0,3 micras

2. Centrifugación o sedimentación pasiva (evita mezclar o agitar en vórtex las soluciones madre de tripán)

3. Calentamiento suave de la solución de tripán de 1 ml a 37°C durante diez minutos.

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